服务介绍:10x Genomics是基于微流控技术,利用Tn5转座酶对某种特定时空下的开放染色质进行切割,并加入上百万独特的Barcode的标记单细胞,通过高通量测序绘制染色质可接近性图谱,该方法可以在单细胞水平揭示细胞核内染色质的可及性差异,为单细胞水平研究表观遗传学的分析奠定数据基础。点击下载“测序服务申请表格”,按需求填写表格并发送至(zhangxinshuang@cibr.ac.cn)。
样本要求:
文库类型 |
组织类型 |
送样指南 |
10X ATAC |
细胞 |
细胞量在1×107-5×107,细胞活性>90%,短时间可寄送,得到细胞悬液后进行细胞抽核,并进行文库构建 |
血液 |
抽取足够量血液加入到含有肝素钠的抗凝管中,短时间可寄送,得到血液后马上进行细胞核的制备并进行后续的建库实验(根据实验目的,血液用量会进行调整) |
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组织 |
取足量的新鲜组织,短时间可寄送,得到组织后马上进行细胞核的制备并进行后续的建库实验(根据实验目的组织量不等) |
技术路线:
常见问题:
Q:制备单细胞悬液的要求是什么?
活率:>90%;
浓度:700-1200 cells/μL;
数目:至少1*107个活细胞(检测用细胞计数仪检测);
直径:5-30 μm;
Q:制备的细胞核悬液的要求是什么?
活性:<5%;(台盼蓝等染色),尽量去除细胞碎片和细胞团;
完整性:显微镜下,细胞核形态完整;
浓度:700-1200 cells/μL;
数目:至少20000个细胞核(检测用细胞计数仪检测);
Q:染色的细胞核还能做10X ATAC吗?
不能,结合DNA染料会影响细胞核内的DNA构象, 导致ATAC的结果存在偏差。
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